叶绿素测定仪采用光电无损检测方法测量叶绿素相对含量：基于叶绿素吸收波长为650nm的红光,但并不吸收波长为940nm的红外光,红外光的发射和接收主要是为了消除叶片厚度等对测量结果的影响。红光到达叶片后,部分被叶片的叶绿素所吸收,少量被反射后,剩下透过叶片被接sho器转换成为相应的电信号,然后通过A/D转换器转换为数字信号,微处理器利用这些数字信号计算叶绿素的相对含量,表示为SPAD值,显示并存储。
怎样正确的使用：
1、 测定仪的测量面积仅为2mm/跨度>3mm,可用于测量相对较小的叶片。样品的厚度可以达到1.2mm的中心。显示测量区域的中心线。用手指按压手指夹，直到叶绿素计滴落，测量结果显示在屏幕上。测量值自动存储在内存中。
2、 当叶绿素计直接在太阳下使用时，人体被用来遮挡阳光，这样测量结果就不会受到影响。
3、不要试图测量厚的部分，如静脉。如果在测量的叶片中有很多静脉，较好的方法是进行多次测量并得到水平值。如果在当前屏幕上出现一系列“滴“声和“---“闪光，则是测量步骤样本剪辑执行错误，未完全密封，在测量未完成前未将样本包含打开，或样本太厚或太小。
4、如果小数点闪烁、小数点或测量值大于50,则不能保证测量精度。如果样品夹的发射或接收窗口脏了或有水，将不会有准确的测量结果。测量前请检查样品夹窗口是否清洁。
测量时又应注意什么事项：
1. 一般来说我们常常利用手持叶绿素测定仪来测定植物的叶绿素含量，并以此判断植物的氮元素含量，但是在测算的过程中，确定SPAD临界值是十分关键的，而由于同一生长条件下不同品种间SPAD值存在较大差异，因此针对于不同的品种，要建立不同的SPAD临界值，这样以来利用手持叶绿素测定仪测算的氮元素含量才有可能是准确的。
2. 在使用手持叶绿素测定仪测定的过程中，如果选用的叶位不同，那么可能得到的测定结果也不同，因此为了得到具有代表性的测定结果，首先应该要同意所选的叶位，一般来说，植株的顶部的几片叶片受土壤中的氮元素含量的影响比较的小，所以在使用进行手持叶绿素测定仪测量的过程中可以选用顶部的那几片叶子。
3. 就同一片叶片而言，其不同的位置测得的SPAD值也是不同的，比如说玉米在叶片中部距基部55%的位置测定结果偏差小，而在40%～60%区域内测定值变异系数比较低。因此在使用手持叶绿素测定仪测定的过程中，还需要注意测量方位的选择，以避免测定误差。